在蛋白质的线性结构中，N端（氨基末端）不仅是多肽链的合成起点，更是调控蛋白质折叠、定位、修饰及降解的关键功能域。随着蛋白质组学研究的深入，N端测序技术已从单一的序列解析工具，演变为揭示蛋白质动态调控网络的突破口，正在推动生命科学研究迈向更高维度的解析层次。N端不仅是蛋白质翻译起始的标志，其修饰状态（如乙酰化、甲硫氨酸切除）还直接反映蛋白质的成熟过程与功能调控。通过解析N端序列，可精准识别蛋白质的剪切变体、降解产物及翻译后修饰事件，为疾病标志物发现和药物靶点筛选提供关键线索。

一、N端测序的技术方法

N端测序的核心目标是确定蛋白质N端（氨基末端）的氨基酸序列。传统方法如Edman降解法通过逐级切除并鉴定N端氨基酸实现测序，但受限于通量和灵敏度。随着质谱技术的突破，基于高分辨率质谱的“自上而下”（Top-down）和“中间向下”（Middle-down）策略显著提升了测序效率，尤其适用于复杂样本中低丰度蛋白的检测。

1、Edman降解：经典而精准的序列测定方法

Edman降解是一种基于化学反应的测序方法，能够逐步识别多肽或蛋白质的N端氨基酸序列。这一技术基于苯基异硫氰酸酯（PITC）与N端氨基酸的特异性反应，通过一系列循环过程逐步切割和鉴定N端氨基酸残基。

特点：

* 适用于纯化的多肽和蛋白质样品，通常可解析长度有限的序列。

• 其高精度使其仍然是小分子肽段测序的金标准，尤其在需要获得明确序列信息的研究中具有不可替代的价值。
• 但对N端修饰的蛋白无能为力，如遇乙酰化等修饰，可能导致反应受阻。

2、质谱法：高通量、灵敏度更高的序列分析工具

质谱技术（MS）已经成为蛋白质组学研究的支撑，N端测序也因此进入了更高效的时代。通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）或基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS），可以解析复杂蛋白混合物的N端序列信息。

特点：

* 可用于大规模蛋白质组分析，适合研究多个蛋白样本的N端序列。

• 能够检测N端修饰，如乙酰化、甲基化等，从而提供更多关于蛋白质功能和加工的信息。
• 适用于复杂样品的分析，但数据处理和解释需要高度专业的生物信息学工具支持。

二、N端测序的多元化应用场景

1、蛋白质鉴定与注释

在基因组注释不完全的物种中，N端测序可验证预测的开放阅读框（ORF），修正错误注释的蛋白质序列，完善蛋白质数据库的准确性。

2、翻译后修饰研究

N端乙酰化作为最常见的修饰类型之一，参与调控蛋白质稳定性、亚细胞定位及相互作用网络。通过N端测序结合修饰富集技术，可系统性解析修饰动态与疾病关联。

3、生物标志物开发

疾病相关蛋白的异常剪切或降解常导致N端序列改变。例如，肿瘤微环境中特定蛋白酶的活性变化可通过N端特征追踪，为液体活检提供新型标志物来源。

4、蛋白降解与代谢研究

蛋白质的降解往往受到N端序列的调控，例如某些降解通路依赖于N端特定的氨基酸信号。解析N端序列有助于研究蛋白降解机制，进而探索其在细胞稳态和疾病过程中的作用。

随着精准医学与系统生物学的发展，N端测序有望与基因组学、代谢组学深度交叉，构建多维度分子关联网络。例如，通过关联N端修饰谱与基因突变数据，可揭示表观遗传调控的新机制；在合成生物学领域，N端工程化设计将助力人工蛋白质的理性开发。N端测序不仅是蛋白质组学研究的基石技术，更是连接分子机制与临床转化的桥梁。百泰派克生物科技依托先进的Edman降解与高分辨率质谱平台，提供高质量的N端测序服务，助力蛋白质组学研究。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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